CONTENU D'ARTEMIZININE DANS DES EXTRAITS D'ARTEMISIA ANNU L E OBTENUS PAR DIFFÉRENTES MÉTHODES Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, SV Zhshzhitzhapova, LD Université d'État Padnaeed Buryat, st. Smolin, 24a, Oulan-Oude (Russie) Université d'État de Tomsk, 36, avenue Lenina, Tomsk (Russie) Institut Baïkal de gestion de la nature, branche sibérienne de l'Académie des sciences de Russie, ul. Sakhyanova, 8, Ulan-Ude (Russie)

Les questions sur l'isolement de l'artémisinine à partir d'Artemisia annua L. et sa détermination quantitative à l'aide de la méthode HPLC-MS sont examinées. L'artémisinine a été isolée par diverses méthodes d'extraction: macération, ultrasons et extraction sous-critique de CO2. La composition en composants des extraits de CO2 et d'hexano a été étudiée par GC-MS.

Introduction

L'artémisinine (1) est un peroxyde sesquiterpène [1], un antipaludique très efficace et un précurseur de composés plus puissants, tels que l'artéméther, l'artésunate et certains autres. L'importance de l'artémisinine et de ses dérivés repose sur l'action très rapide d'un composé de ce type contre son principal agent pathogène, Plazmodium falciparum, qui provoque également une maladie du cerveau. La synthèse chimique et biochimique de l'artémisinine s'est avérée très coûteuse et, par conséquent, actuellement non viable comme source principale de production d'artémisinine [2].

Le paludisme est causé par un microorganisme - le paludisme à Plasmodium. Il existe 4 types de plasmodium de ce type, parasitaires dans le corps humain: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae et P. falciparum. Au milieu du XXe siècle, grâce à l'utilisation généralisée de la quinine et de ses dérivés, il fut possible de réduire considérablement le nombre de patients atteints de paludisme. Cependant, depuis les années 60. le paludisme du siècle dernier s’est rappelé à lui-même. Cela est dû au fait qu'en Thaïlande et en Amérique du Sud, le paludisme Plasmodium (P. falciparum), résistant à la quinine, à la chloroquine, à la méfloquine et à d'autres médicaments à base de quinoléine, est apparu et s'est propagé dans d'autres régions [3, 4]. Le problème de la recherche de nouveaux médicaments antipaludiques efficaces, parmi lesquels l’artémisinine a été proposée, est devenu un sujet d’actualité. Ce composé unique a été découvert en Chine (le nom chinois est qinghaosu). Les travaux ont été commencés en 1967 et s'appelaient «Programme 523» [5]. Il est isolé de l'absinthe de l'Atemisia annua L., une plante annuelle répartie sur le territoire de l'ex-URSS et couvrant les régions de l'Altaï, Transbaikalia, la région d'Amour, le Kazakhstan, le Kirghizistan, l'Ouzbékistan et le Turkménistan. Wormwood est largement représenté en Chine et dans d'autres pays [6]. La quantité totale d'artémisinine isolée à partir de différentes parties d'A. Annua est d'environ 0,01 à 1,4% de la masse de la feuille sèche [2].

Artemisia annua L. est la principale matière première utilisée pour la production d'artémisinine. En 2001, l’Organisation mondiale de la santé avait recommandé l’utilisation de l’artémisinine comme traitement de première intention contre le paludisme, ce qui a entraîné une augmentation de la superficie consacrée à l’anisse d’un an. La plupart des absinthe est cultivée chaque année en Asie de l’Est, principalement en Chine et au Vietnam (70% de la superficie du stock mondial), récemment introduite dans la culture en Afrique orientale et australe (20% de la superficie du stock mondial), qui fournit un quart des besoins mondiaux en matière de santé. [7]
En plus de l'artémisinine, A. annua est appréciée pour son huile essentielle, à l'arôme sucré et herbacé caractéristique, qui est utilisée dans les produits de parfumerie et les cosmétiques. En outre, l'huile a des propriétés antibactériennes et peut être utilisée pour traiter les maladies de la peau. En plus des lactones sesquiterpéniques, qui ont la principale valeur thérapeutique, les huiles essentielles de cette plante contiennent une quantité importante de composants qui ont de la valeur, tels que le 1,8-cinéolé, l’artemisia alcool et la cétone, le bornéol, etc. ont également analysé l'effet physiologique d'extraits lipophiles sur la peau [2].
Compte tenu de la composition riche et diversifiée de substances biologiquement actives contenues dans Artemisia annua, la recherche de nouveaux domaines de croissance de l'absinthe annuelle présente un grand intérêt. En République de Bouriatie, 46 espèces de polyniomes poussent [8], y compris Artemisia annua L. Le contenu d'artémisinine en Pologne, âgé d'un an et poussant en Bouriatie, n'avait pas encore été étudié. Par conséquent, l'objectif de ce travail était la détermination quantitative de l'artémisinine dans des extraits obtenus par différentes méthodes d'extraction.

Partie expérimentale

La matière première de l'étude a été sélectionnée dans la partie aérienne de la annuelle annuelle polonaise Artemisia annua L., collectée au cours de la première décennie d'août 2010, en phase de floraison.
L'isolation de l'artémisinine et d'autres substances biologiquement actives (huile essentielle) a été réalisée à l'aide de différentes méthodes d'extraction: macération, extraction par ultrasons et extraction sous-critique de CO2. L'extraction a été réalisée sur des installations de laboratoire. De l'hexane, de l'acétate d'éthyle, de l'éthanol et du CO2 ont été utilisés comme agents d'extraction. Les données et les paramètres d'extraction sont présentés dans le tableau 1. Les extraits du précipité ont été séparés par centrifugation dans une centrifugeuse OP-8UHL4.2 à 5 000 tr / min, puis filtrés sur un système de filtration d'échantillons.
La quantification de l'artémisinine a été déterminée par HPLC-MS à l'aide d'un chromatographe en phase liquide à haute performance Finnigan Surveyor équipé d'un auto-échantillonneur automatique Plus et d'une pompe LC Pump Plus avec un détecteur Finnigan LCn Advantage MAX (piège à ions), méthode d'ionisation - électrospray. Colonne "Hypersyl Gold" 150 × 4 mm, remplie de sorbant de gel de silice avec des phases greffées en C18 (taille de particule 5 µm), (fabriquée par Thermo electronic corporation, USA). L'élution a été réalisée en mode isocratique (50% (A): 50% (B)), la composition du tampon de départ (A) était une solution aqueuse d'acide formique, (pH = 3) + 2 ml d'une solution saturée d'acétate d'ammonium, tampon d'élution (B) - 100% acétonitrile. Le débit volumétrique de l'éluant est de 0,5 ml / min, le volume de l'échantillon injecté (échantillonneur automatique) est de 25 µl. L'enregistrement des ions a été effectué dans le mode de surveillance des ions chargés positivement (SIM, Ion Monitoring), avec une masse moléculaire de 300 (en raison de l'ajout d'ion ammonium NH4 à la molécule d'artémisinine) avec une largeur de fenêtre (299-301) m / z. La détermination quantitative a été effectuée en utilisant la méthode de l'étalon interne en utilisant l'échantillon d'étalon d'état de Sigma.

Méthodes et paramètres d'extraction

No. p / p Méthode d'extraction Extrant Temps d'extraction / paramètres d'extraction Contenu en artémisinine en%, en termes de a.s.s.
1 Macération d'éthanol 24 h / matières premières: rapport solvant (1: 5) 0.040 ± 0.002
2 Ethanol de macération 48 h / matières premières: rapport solvant (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Macération d'hexane 24 h / rapport échantillon: solvant (1: 5) 0,039 ± 0,002.
4 Extraction ultrasonique éthanol 15 min / rapport matières premières: solvant (1: 5), fréquence de sondage 50 Hz, T = 25 ° C 0,039 ± 0,002
5 Extraction par ultrasons acétate d'éthyle 15 min / matières premières: rapport du solvant (1: 5), fréquence de sondage 50 Hz, T = 25 ° C 0,022 ± 0,001
6 extraction de CO2 so2 24 h / débit 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0 à 6,2 MPa 0,054 ± 0,003

De plus, les composants volatils des extraits au CO2 et à l'hexane ont été étudiés par spectrométrie de masse par chromatographie sur un chromatographe en phase gazeuse Agilent Packard HP 6890 avec un détecteur quadripolaire MSD 5973N. Nous avons utilisé une colonne de quartz TR-5 ms de 30 mètres avec un diamètre interne de d = 0,25 mm et une épaisseur de film de 0,25 µm. La séparation chromatographique a été réalisée comme décrit dans [9]. Les composants des extraits ont été déterminés qualitativement en comparant les spectres de masse totaux aux données d'un chromatographe de données de spectrométrie de masse de substances volatiles d'origine végétale A. Tkachev, bibliothèques NIST 08 et Wiley 275. Les résultats de l'analyse sont présentés dans le tableau 2.

Les principaux composants des extraits de CO2 et d'hexane
Zone de pic relatif Connexions Zone de pic relatif
Composés d'extrait de CO2 extrait d'hexane
Extrait de CO2 Extrait d'hexane
Monoterpénoïdes hydrocarbures à longue chaîne
Tricycylène 140181 - Tricosane 103969 52288
a-pinene 1155320 - Tricozen-1 1956324 -
Camphene 2021028 - n-Pentacosane 534763 110485
R-pinen 371548 1683858 645634 - - -
n-heptacosane 279800 132358
3-caren

Hydrocarbures cycliques
Limonen
Pentacyclo 576196 -
R-phellandren 587143 - [7.5.0.0 (2.8).0 (5.14) 0.
1,8-cinéole 133599 - (7.11)] tétradécane
Artemisia cétone 1413437 - 1,8-diméthylphénanthrène 3765681 1080289
Borneol 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Acétate de Bornyl

Diterpénoïdes
Sesquiterpénoïdes
3,5-bis (éthylamino) benzoate de méthyle 627581 283913
Cariofillen 370714 214560 - -

Oxyde de Karyofillen
Germacren D 214913 -
R-Sélinène 3053333 328535
a-cadinol 149485 -

Discussion des résultats

Comme le montrent les données présentées dans le tableau 1, le rendement le plus faible en artémisinine était de (0,022%) avec extraction par ultrasons à l'acétate d'éthyle. La teneur en artémisinine d'extraits isolés par extraction par ultrasons et macération utilisant différents solvants (hexane, alcool éthylique) n'est pas significativement différente de 0,038-0,040% en termes de A. p. Lorsque vous insistez pendant 24 et 48 heures avec de l'absinthe à l'alcool éthylique chaque année, la teneur en artémisinine dans les extraits obtenus est approximativement la même que 0,040 et 0,038%, respectivement. Le rendement le plus élevé en artémisinine (0,054%) a été obtenu lors de l'extraction pré-critique de CO2. À des fins de comparaison, nous présentons quelques données sur la teneur en artémisinine, dans l’absinthe d’un an, poussant dans divers territoires. Artemisia annua L., qui pousse dans diverses régions de Chine, contient de 0,01 à 0,22% d'artémisinine. Certains hybrides d'absinthe annuelle cultivés en Chine et au Vietnam contiennent de 1,0 à 1,5% d'artémisinine [10]. La teneur en artémisinine d'A. Annua, qui poussent sur le territoire de l'ex-URSS, est la suivante (les valeurs sont exprimées en termes de matières premières sèches à l'air): RSS de Géorgie (0,005%), RSS du Kirghizistan (0,025%), RSS de Moldavie (0,01-0,02%), Territoire de Krasnodar (0,04%), RSS d’Ukraine (0,005-0,05%), Turkménistan (0,05% en c.a.), Kazakhstan (0,01-0,05% en termes de A.S.S.) [11].
Dans l'étude de la composition des extraits d'absinthe annuelle, obtenue par extraction au CO2 et macération, lorsque l'hexane était utilisé comme agent d'extraction, la spectrométrie de masse par chromatographie a révélé des différences significatives dans la composition de ces extraits. Les monoterpénoïdes, les sesquiterpénoïdes, les hydrocarbures à longue chaîne, les hydrocarbures cycliques et les diterpénoïdes sont détectés par la méthode de spectrométrie de masse.
Les monoterpénoïdes ne se trouvent que dans l'extrait de CO2. Les principaux composants de l'extrait de CO2 sont l'a-pinène, le 3-carène, l'artémisia cétone, le (3-sélénène, le tricozen-1, le 1,8-diméthylphénanthrène et le fluorène.

Dans l'extrait hexanique d'absinthe par chromatographie annuelle en phase gazeuse-spectrométrie de masse, on a principalement identifié des hydrocarbures à longue chaîne et des hydrocarbures cycliques, le 3-sélénène étant détecté dans sesquiterpénoïdes.
En plus de l'artémisinine, qui a une valeur médicinale première, l'huile essentielle contient un grand nombre de composants ayant une valeur biologique, tels que l'artémisia cétone, le 1,8-cynéol, le bornéol, etc.

Conclusions

1. La teneur en artémisinine de divers extraits de A. annua (partie aérienne, phase de floraison) poussant sur le territoire de la République de Bouriatie a été déterminée par HPLC-MS.
2. La teneur maximale en artémisinine se trouve dans l’extrait de CO2 (0,054% en termes de ca.).
3. À l'aide de la spectrométrie de masse par chromatographie, la composition de l'huile essentielle extraite par diverses méthodes d'extraction a été étudiée.

Artemisia annua L.
Description du taxon

Noms russes

Systématique

Des images

Plantes sur la carte

Description botanique

Artemisia annua L. Sp. pl. (1753) 847; Bess. dans Nouv. Mem. Soc. Nat. Mosc. III, 81; Dc. Prodr. VI, 119; Ldb. Fl. Ross. II, 592; Boiss Fl. ou. III, 371; Maxim à Bull. Acad. Sc. Petersb. Viii, 528; Crochet Fl. Le fr. Ind. III, 323; Com en fl. Manch. III, 659; Nakai, Fl. Coréen. II, 30; Fedch. Liste var. Turc IV, 200; Rydb. North Am. Fl. 34, partie 3, 259; Pampan à Nuov. Giorn. Bot. Ital. n.s. XXXIV, 637; Hall et Clem. Artem (1923) 102; Com et alice. Opt. var. Extrême-Orient cr. II, 1036; Krasheninn. en fl. sud-est Europ Partie URSS, VI, 357; Grossg. Fl. Kavk. IV, 138; Krasheninn. et des ailes. Fl. Zap Sib. XI, 2816; Pôle à Mayevsky, FL. 586. - A. chamomila Winkl. dans Tr. Pétersbourg bot Garden, X, 87; Fedch. cit. cit. - Ic.: Amm. Stirp. rar t. 193, f. 23; Gmel. Fl. fratrie II onglet. 25. - Ex.: ГРФ № 3152. - Un an d'absinthe.

Annuelle La plante est odorante, verte, nue ou avec de petits poils adjacents épars, avec une tige droite, côtelée, brunâtre ou pourpre-brunâtre de 30–100 cm de haut.; les feuilles sont pointillées-fossa-ferrugineuses, pétiolées inférieures, 3-5 cm de long. et 2-4 cm de large., ovales, trois fois pinnaculaires, segments du dernier ordre, oblongs-lobés, à pointe courte; entier ou avec 1-2 dents, 1-2 mm de long. et 0,5 mm de large; les feuilles du milieu et de la tige sont doubles, pennées, sessiles supérieures, plus petites et moins complexes, les bractées supérieures sont simples ou avec un petit nombre de lobules latéraux. Les paniers sont sphériques, larges de 2-2,5 mm, nombreux, rejetés ou tombants, sur de courtes pattes, réunis sur de courtes branches, en b. inflorescence pyramidale pyramidale longue; la cape est lisse, les folioles externes sont linéairement oblongues, vertes, ovales internes ou presque rondes, avec une bordure brillante à larges bords autour du bord; réceptacle convexe, nu; fleurs pistillées marginales, au nombre de 10–20, à ciformes filiformes, à points glandulaires, étroitement linéaires, lobes du stigmate, obtus, exposés à partir d'un tube; les fleurs du disque sont bisexuées, au nombre de 12–30, tubulaires à coiffe étroite, nues; anthères étroitement linéaires, appendice supérieur allongé, à angle aigu, lobes basaux très courts, pointus; la colonne est plus courte que les étamines, le stigmate du stigmate est linéaire, droit, légèrement dévié, cilié au sommet; akènes de 0,8–0,6 mm de long., oblongs-ovés, plats, à l'apex avec une petite plateforme arrondie, à peine tranchants le long du bord. Couleur VIII - IX.

Dans les endroits envahis de mauvaises herbes près des habitations, des jardins, des jardins. - Europe. h.: Upper Dniester., Upper Dnieper., Volzh. Don., Volga., Lower Don., Black., Bess., Crimée; Caucase: occidental et oriental. Trans., Tal., Wed. Asie: Aral-Casp., Balkh., J.-Tarb., Tien-Shan., Syr-Dar., Pam. - Al., Amu-Dar., Horn. Turc Total var.: mer Heb., Srediz., Balk. -Maloaz., Arm.-Kurd., Iran, J.-Kashg., Kit., Jap., Mongolie, Nord. Amérique (alien).

Le type de vue est les dessins d'Amman et Gmelin.

Khoz. valeur Le rendement en huile essentielle est de 0,1-0,64% (selon Goryaev). Selon Joshikazu Imade (1937), le cinéol et la substance C10H6O sont dans l'huile; cette substance a été étudiée en détail par Ashania et Joshitomi (1917); avec artemacyaketon, son isomère, l'isoartemisieacetone, a été trouvé dans l'huile. Cette cétone a pu être isolée de la liqueur mère restante dans la préparation du semi-carboson d’artémacyacétone. Seisi Takagi (1928), poursuivant l’étude du Japonais A. annua, ajoute aux 4 composants connus dans l’huile deux autres nouveaux: le cadinène et le karyophile. D'après les recherches de Rutovsky et Vinogradov (1929), l'huile est composée d'alpha-pinène, de cynéol, de camphène, d'artémiscétone et d'isoartémisiescétone, d'une petite quantité d'acidésol, d'acides acétique et butyrique, de kimuno aldéhyde (probablement du semicarbosone) et de phénol (probablement de l'holénol). Une petite quantité d'alcaloïdes a été trouvée dans les parties souterraines (Lazurievsky, Sadykov, 1939; Massagetov, 1947). Selon les observations sur le terrain (Yunatov, 1954), à l'état vert, le bétail ne mange pas. La présence d'alcaloïdes est confirmée par M.I. Goryaeva, G.K. Kruglykhina, E.I. Satdarova (1959).

Résumé et thèse de médecine (14/04/02) sur le sujet: Etude pharmacognostique d’Artemisia annua L. et Artemisia sieversiana Willd. flore de la Bouriatie

Résumé de thèse en médecine sur le sujet Etude pharmacognostique d'Artemisia annua L. et Artemisia sieversiana Willd. flore de la Bouriatie

Comme manuscrit

Soktoeva Tuyana Erdemovna

PHARMACOGNOSTIC RESEARCH ARTEMISIA ANNUA L. ET ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. FLORE DE BURYATIA

14/04/02 - chimie pharmaceutique, pharmacognosie

Résumé de thèse pour le degré de candidat en sciences pharmaceutiques

Le travail de thèse a été effectué à l'Établissement d'enseignement supérieur professionnel «Université de Bouriatie» du ministère de l'Éducation et des Sciences de la Fédération de Russie sur le budget de l'État fédéral et à l'établissement de l'Académie des sciences de Russie de l'Institut de gestion de l'environnement de Baïkal, branche sibérienne de l'Académie des sciences de Russie

Superviseur: docteur en sciences chimiques, professeur

Radnaeva Larisa Dorzhievna

Opposants officiels: docteur en sciences biologiques, professeur

Antsupova Tatyana Petrovna

Candidat en sciences pharmaceutiques Mongolov Hanhai Purbuevich

Organisation principale: Etat de Perm

Ministères de la santé et du développement social de la Fédération de Russie

La soutenance aura lieu le 23 décembre 2011 à 10 heures lors de la réunion du Conseil de la thèse DM 003.028.02 à l'Institut de biologie générale et expérimentale de la BS ASR, au 6, rue Sakhyanova, Oulan-Oude, 670047.

La thèse est disponible à la bibliothèque scientifique centrale du centre scientifique de Bouriatie de la BS ASR.

Le résumé publié le 22 novembre 2011.

Secrétaire scientifique du Conseil de thèse candidat aux sciences biologiques

DESCRIPTION GÉNÉRALE DU TRAVAIL Pertinence du sujet. Les plantes du genre Artemisia (absinthe) sont des sources prometteuses de substances biologiquement actives, telles que l'absinthe à l'estragon Artemisia dracunculus L., l'absinthe Artemisia absinthium L., l'absinthe Artemisia vulgaris L. est largement utilisée dans la médecine traditionnelle et l'industrie alimentaire. Artemisia annua L., une absinthe annuelle, a été introduite avec succès dans de nombreux pays. En 2001, elle a été recommandée par l'OMS comme source principale d'artémisinine, le traitement de première intention contre le paludisme. Aujourd'hui, les pays producteurs d'artémisinine fournissent environ un quart des besoins de santé mondiaux (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). Parmi les sujets d'un an, 137 composés biologiquement actifs ont été isolés, dont 40 sesquiterpènes, 10 triterpènes, 7 coumarines, 46 flavonoïdes, qui peuvent servir de base au développement de médicaments (Bhakuni, 2001). Dans les années 80 du 20ème siècle, un groupe de scientifiques (Schroeter, 1989) a tenté de cultiver la partie sauvage de la flore d'un an de l'URSS dans la CISA (Moscou). L’Université d’État de Tomsk est actuellement en préparation de travaux majeurs sur l’introduction du programme de première année. En Bouriatie, Annuelle est une espèce à croissance sauvage.

En plus du parasite annuel en Bouriatie, Artemisia sieversiana Willd, une absinthe tordue, est répandue et constitue également une espèce prometteuse. L'herbe de Seabera contient des flavonoïdes, de l'huile essentielle et des coumarines (Tkachev, 2002; Shatar, 1998; Hanina, 1999; Suleimenov, 2009). L'huile essentielle de Sivers présente un intérêt en tant que source de chamazulène, un composé non toxique ayant des effets anti-inflammatoires, bactéricides et régénérants (Berezovskaya, 1991; Khanina, 1992).

Jusqu'à présent, une étude chimique détaillée de l'absinthe et de l'absinthe de la flore annuelle de la Bouriatie de Sivers n'a pas été réalisée en tant que source prometteuse de substances biologiquement actives. Leur étude est donc une tâche urgente.

Objectif: Etude pharmacognostique de l’Arsinthe de Sivers Artemisia sieversiana Willd. et Artemisia annua L., une plante annuelle d'absinthe, en tant que sources précieuses de substances biologiquement actives.

Pour atteindre cet objectif, il est nécessaire de résoudre les tâches suivantes:

1. Identifier les signes anatomiques et diagnostiques de la partie aérienne de Sivers et de P. un an, pour établir des indicateurs de marchandisage

matières premières, évaluer les réserves et les possibilités de récolte par an et par Siversa sur le territoire de la République de Bouriatie;

2. étudier la composition chimique des principaux groupes de substances biologiquement actives de ces plantes et déterminer leur contenu quantitatif, établir la localisation des huiles essentielles et de l'artémisinine dans des parties individuelles de plantes, étudier la dynamique de leur accumulation dans les phases de développement et déterminer les conditions optimales de collecte;

3. Développer une méthode pour la détermination quantitative de l'artémisinine dans la partie aérienne de l'enfant d'un an;

4. Déterminer les indicateurs de qualité et les normes pour le contenu des substances biologiquement actives de base, élaborer une documentation réglementaire sur les matières premières médicinales - l'herbe de l'absinthe Sivers et l'herbe de l'absinthe annuelle.

Nouveauté scientifique. Les principales caractéristiques diagnostiques de l'herbe de Sivers et de P. annual ont été établies, ainsi que les indicateurs numériques nécessaires à la normalisation des matières premières.

Une étude a été réalisée sur la composition chimique de l'herbe de Sivers et de l'herbe d'un an. La teneur en huiles essentielles, flavonoïdes, acides gras, macro et micro-éléments a été déterminée. Les flavonoïdes - lutéoline-7-glucoside, rutine, quercétine et chryoériol ont été détectés par la méthode HPLC-MS sur ces plantes. Les principaux acides gras des types d’absinthe étudiés sont l’acide palmitique, linoléique, linolénique et à 10% d’octadekéniques.

Les conditions d'extraction de l'artémisinine (type d'extractant, méthode d'extraction, durée d'extraction) de la plante annuelle ont été déterminées et il a été établi que l'extraction maximale de l'artémisinine est obtenue par extraction ultrasonore et subcritique au CO2. Par HPLC-MS, il a été établi que la plus grande quantité d'artémisinine chez l'enfant d'un an se trouvait dans la phase de floraison des inflorescences.

Étude de la dynamique de l'accumulation d'huile essentielle, en fonction de la phase de développement et d'une partie de la plante. La plus grande quantité d'huile essentielle de chamazulène P. Siversa s'accumule pendant les phases de bourgeonnement et de floraison des inflorescences.

Les indicateurs de qualité établis de BAS inclus dans les documents réglementaires.

Signification pratique. Les réserves et le volume annuel possible d’achat d’un règlement de Sivers et d’un règlement d’un an sur le territoire de la République de Bouriatie (règlement de Sivers - de 0,1 à 73,7 tonnes par an, et d’un règlement d’un an - de 1,2 à 122,3 tonnes par an).

Une technique a été développée pour la détermination quantitative de l'artémisinine dans l'herbe par une méthode HPLC-MS annuelle. Les conditions pour la préparation des échantillons de matières premières à analyser pour la détermination quantitative de l'artémisinine sont scientifiquement justifiées.

La normalisation des matières premières a été effectuée et des projets de systèmes de stockage ont été développés - «Sivers Wormwood Herbal» et «Wormwood One Year Grass».

Le degré de mise en œuvre. La méthode d'extraction des huiles essentielles et les données d'analyse microscopiques ont été testées et introduites dans le processus pédagogique du département de pharmacie de l'établissement d'enseignement supérieur professionnel «Université de Bouriatie» (Loi de mise en œuvre n ° 1 du 6 septembre 2011). Des projets de FS sur l'herbe de l'absinthe Sivers et l'absinthe d'un an sont préparés pour examen.

À la défense sont sortis:

• les résultats de l'étude de la structure anatomique, des stocks, des critères d'authenticité de Sivers et de P., en croissance en Bouriatie;

• résultats d'une étude chimique de substances biologiquement actives et de leur dynamique saisonnière d'accumulation;

• les résultats d'études sur la normalisation de la partie aérienne de Sivers, page par année.

Approbation du travail. Les principales dispositions de la thèse ont été présentées et discutées lors: d'une conférence scientifique et pratique à participation internationale intitulée «Le développement de la médecine traditionnelle en Russie: expérience, recherche, perspectives» (Ulan-Ude, 2010); 7e symposium d'hiver sur la chimiométrie "Méthodes modernes d'analyse des données" (Saint-Pétersbourg, 2010); la conférence scientifique internationale consacrée au 15e anniversaire de l'Université d'Etat de Bouriatie "Etudes actuelles sur l'Asie du Baïkal" (Oulan-Oude, 2010); 5e conférence scientifique et pratique internationale "Priorités et caractéristiques du développement de la région de Baïkal" (Ulan-Ude, 2011); Xème conférence scientifique et pratique internationale "Problèmes de botanique de la Sibérie du Sud et de la Mongolie" (Barnaul, 2011); IVe Conférence panrusse "Nouveaux progrès de la chimie et de la technologie chimique des matériaux de plante" (Barnaul, 2009); XVIe Conférence internationale d'étudiants, de diplômés et de jeunes scientifiques "Lomonosov-2009" (Moscou, 2009); XVe Conférence internationale des étudiants en écologie "Écologie de la Russie et des territoires adjacents" (Novossibirsk, 2010); II Conférence scientifique et pratique pan-russe regroupant des étudiants, des étudiants diplômés et de jeunes scientifiques "Technologies et équipements de l'industrie chimique, biotechnologique et alimentaire" (Biysk, 2009); Conférence scientifique et pratique pan-russe "Végétation

La région de Baïkal et les territoires adjacents »(Ulan-Ude, 2011); 5e séminaire scolaire de jeunes scientifiques de Russie sur «Les problèmes du développement durable de la région» (Ulan-Ude, 2009); la conférence scientifique et pratique régionale pour les jeunes avec une participation internationale "Technologies et matériaux respectueux de l'environnement et respectueux de l'environnement" (Ulan-Ude, 2010).

Les travaux ont été réalisés dans le cadre de projets de recherche: RFBR: 08-04-90202-Mong_a "Etude des schémas biogénétiques de biosynthèse de composés biologiquement actifs de plantes endémiques de l'Asie centrale" (2008-2009), 08-04-98037-r_sibir_a "Composition chimique des plantes en tant qu'indicateur l'état des écosystèmes de la région de Baïkal "(2008-20 Yugg,); projet d'intégration interdisciplinaire n ° 93 "Développement de la recherche dans le domaine de la chimie médicale et de la pharmacologie en tant que fondement scientifique du développement des médicaments destinés au marché intérieur"; un projet commun avec l'Académie des sciences de Mongolie "Obtenir de nouvelles formes de médicaments sous forme de liposomes et de nanosomes à l'aide de matières premières naturelles"; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Mobilité des jeunes scientifiques" (2010), 11-03-90705-mob_st travaux scientifiques (formation) de jeunes scientifiques russes dans les principales organisations scientifiques de la Fédération de Russie, 2011 (2011).

Publications. Selon les résultats, 17 articles scientifiques ont été publiés, dont 3 dans des périodiques recommandés par la Commission d'attestation supérieure du ministère de la Défense et des Sciences de la Fédération de Russie.

La portée et la structure de la thèse. Le travail de thèse est présenté sur 172 pages de texte dactylographié et consiste en une introduction, une revue de littérature (1 chapitre), une partie expérimentale (4 chapitres), des conclusions générales, une liste de références et d'applications. Le travail est illustré par 37 tableaux et 61 figures. L'index bibliographique comprend 139 sources, dont 42 étrangères.

Dans l'introduction, la pertinence du sujet est justifiée, le but et les objectifs de la recherche sont formulés, la nouveauté scientifique et la portée pratique du travail sont présentées.

Le premier chapitre (revue de la littérature) présente des données sur la composition chimique, le spectre d'activité pharmacologique, l'utilisation du genre Artemisia L. dans la pratique de la médecine traditionnelle et moderne.

Le deuxième chapitre (matériels et méthodes) présente des données sur les objets d'étude, les méthodes utilisées, les dispositifs et réactifs, ainsi que d'autres informations méthodologiques.

Les troisième et quatrième chapitres fournissent des données sur l’étude des signes anatomiques et diagnostiques de Severs S et d’un an. Par méthode

La spectrophotométrie UV a déterminé la teneur totale en flavonoïdes et en tanins dans les objets d'étude. À l'aide de la GC-MS, la composition qualitative et quantitative en huile essentielle et en acides gras de l'absinthe a été étudiée. La méthode HPLC-MS a établi le contenu qualitatif et quantitatif des flavonoïdes. La composition élémentaire des plantes a été déterminée par la méthode AAS. Une technique de quantification de la teneur en artémisinine a été développée et proposée. par HPLC-MS. En outre, nous avons étudié la composition chimique des huiles essentielles des cinq types de polynies qui se trouvent le plus souvent sur le territoire de la Bouriatie et de la Mongolie - l’armoise de Gmelin Artemisia gmelinii Web. et Stechm., absinthe, Artemisia glauca gris Pall, ex Wild., absinthe, Artemisia macrocephala à grande crête Jacq. ex Bess., absinthe de Sievers Artemisia sieversiana Willd. et Artemisia annua L.

Le cinquième chapitre fournit des données sur la normalisation de l'herbe de Sivers et de P., âgée d'un an, proposées comme sources prometteuses de chamazulène et d'artémisinine, respectivement.

Le contenu principal du travail

Objets et méthodes de recherche. Les objets de l'étude étaient des échantillons d'herbe de Sivers et de villages annuels collectés dans divers districts de la Bouriatie (Ivolginsky, Pribaikalsky, Selenginsky, Tunkinsky, Zakamensky, Kurumkansky) de la région d'Irkoutsk (île d'Olkhon) et de la Mongolie (Selenginsky Aimak) à compter de 2008. jusqu'en 2011

L'analyse microscopique a été réalisée conformément à l'article "Technique d'analyse microscopique" (GF XI, numéro 2) sur les microscopes Mikmed (Lomo, Russie) avec un oculaire 10x; lentilles 4x, 10x, 40x et MS-300 (TFXS), ensemble de système fluorescent (Micros, Autriche) avec un oculaire 10x; lentilles 4x, 10x, 40x. Le rendement des matières premières a été déterminé par la méthode de comptabilisation des sites.

L'extraction de l'huile essentielle a été réalisée par hydrodistillation, les extraits ont été obtenus par extraction par ultrasons, extraction au CO2 et macération.

L'étude de la composition qualitative et quantitative de ces objets a été réalisée par les méthodes suivantes: GC-MS, HPLC-MS, CCM, BC, spectrophotométrie UV et AAS. L'analyse par spectrométrie de masse chromatographique a été réalisée sur un chromatographe en phase gazeuse Agilent 6890 avec un spectromètre de masse quadripolaire HP MSD 5973N (Agilent Technologies, USA; colonnes: HP-5ms, g = 0,25 mm, épaisseur de film 0,25 µm (copolymère - 5%, diphényle). - 95% de diméthylsiloxane) et DBWax avec un diamètre intérieur de 0,25 µm, gaz porteur - hélium, g) débit 1–1,5 ml / min; L’analyse HPLC-MS a été effectuée sur des chromatographes en phase liquide à haute performance. Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, États-Unis) et Agilent 1200 (Agilent Technologies, USA).

USA) avec détecteur sélectif de masse «LCQ Advantage MAX» («piège à ions») de la marque «Finnigan» (Thermo Scientific, États-Unis) et avec un détecteur de spectrométrie de masse tandem («piège à ions») 6330 (Agilent Technologies, États-Unis), méthode ionisation électrospray; conditions: Hypersyl Gold Cl8, colonnes de 5 microns, 150x4 mm (Thermo electronic corporation, USA) et Zorbax Eclipse C18, 5 microns, 4.6 * 150 mm (Agilent Technologies, USA), débit d'éluant 0,5 ml / min. L'analyse par CCM a été réalisée sur des plaques Sorbfil PTSH-P-A-UV (Imid Ltd, Russie); L’analyse BC a été réalisée sur du papier FN 6 (Filtrak, Allemagne); Les spectres d'absorption ont été enregistrés sur un spectromètre StellarNet Green Waiv (StellarNet Inc., USA), l'analyse AAC a été réalisée sur un spectrophotomètre SOLAAR MB (Thermo scientific, USA) et le modèle Varían AA240 (Varian, Russie).

Le traitement statistique des données expérimentales a été effectué par la méthode d'analyse statistique de variation. Une partie des données a été traitée par CIM (progiciel Sirius version 6.0, Pattern Recognition Systems, a / s, Norvège).

Caractéristiques pharmacognostiques de l'herbe de P. Sivers et P. de l'été. Les indicateurs suivants de la qualité des matières premières médicinales. L'herbe frise l'absinthe. Matières premières entières. Le dessus des tiges florifères, solide ou partiellement feuillu, ne dépasse pas 45 cm de long et ne contient pas de parties grossières de la tige. Tige pubescente, droite, côtelée et ramifiée. Les feuilles radiales et moyennes sont pétiolées, triangulaires larges, triples pennées, tranches plates et oblongues, de 1,4 à 2,5 cm de long, de 0,1 à 0,5 cm de large.Panettes hémisphériques de 0,4 à 0,6 cm de diamètre, larges inflorescence paniculée. Edge fleurs pistillées (il y en a environ 18). Fleurs bisexuées, nombreuses, à corolle en entonnoir.

Annuelle de l'absinthe Matières premières entières. Le dessus des tiges florifères, solide ou partiellement feuillu, ne dépasse pas 50 cm de long et ne contient pas de parties grossières de la tige. La tige est nue, droite, sillonnée, verte au début de la saison de croissance, violet foncé à la fin. La feuille de la tige inférieure et moyenne est ovoïde ou ovale, de 1,5 à 7,0 cm de long sur le pétiole, de longueur elliptique, sans ailes, trois fois surexprimée en segments, segments et segments larges, de 0,5 à 0,8 cm de long, non large plus de 0,2 cm. Paniers avec un diamètre d'environ 0,2 cm en inflorescence paniculée.

Lors de l'étude anatomique de l'herbe de P. Sivers et P. un an, un certain nombre de caractéristiques anatomiques et diagnostiques ont été identifiées. Le tableau 1 présente la structure des feuilles d'absinthe. La tige de l'absinthe de Sivers est grossière et les cellules de l'épiderme sont allongées.

Il existe des glandes d'huile essentielles, des poils en forme de T et des cellules stomatiques arrondies. La tige a une structure de type poutre. Dans les côtes sont des zones de la mince. Les poutres collantérales disposées en cercle sont caractérisées par un sclérenchyme fortement développé. Endoderme bien marqué, constitué de grandes cellules à paroi mince et de forme ronde étroitement adjacentes.

Caractéristiques de la structure anatomique des feuilles de P. Sivers et P. 1 an __

Sivers absinthe épiderme absinthe annuel

mur droit supérieur mur droit

mur d'enroulement inférieur bas anvil

type d'appareil d'Ustigichesky anomocytic supérieure

anomocytaire inférieur, stomates plus que sur la face supérieure de la feuille

stomates de forme ovale avec cellules stomales de lentille

Caractéristiques des poils densément pubescents avec des poils en forme de T constitués de jambes à deux, quatre cellules et de poils multicellulaires flagellés, il existe deux types de poils: stelleux et en forme de T avec une jambe multicellulaire

Les structures contenant des terpénoïdes sont de grandes glandes à huile essentielle multicellulaires. récipients schizogéniques et cellules parenchymales non spécialisées

à la pointe d'un an, cellules de l'épiderme allongées, à tige cannelée et presque nue. Dans la tige de l'enfant d'un an, ainsi que dans celle de S. Sivers, une structure de type puchkovy, se trouvent des glandes sébacées à l'huile, rarement des poils et des cellules stomatiques ovales; Dans les deux types d'absinthe, les cellules épidermiques de la corolle des fleurs tubulaires sont à parois minces, allongées avec des extrémités pointues, caractérisées par la présence d'un grand nombre de glandes sébacées essentielles et l'absence de poils.

Des indicateurs de marchandisage ont été établis sur plusieurs lots de matières premières:

L'herbe frise l'absinthe. Humidité (pas plus de 7%), cendres totales (pas plus de 11%), cendres insolubles dans l'acide chlorhydrique à 10% (pas plus de 2%), substances extractives (pas moins de 33%), feuilles brunes et noircies (pas plus de 5%) ), impureté organique (pas plus de 2%), impureté minérale (pas plus de 0,5%).

Annuelle de l'absinthe Humidité: pas plus de 7%, cendres totales (pas plus de 9%), cendres insolubles dans l'acide chlorhydrique à 10% (pas plus de 1%), substances extractives (pas moins de 42%), feuilles brunes et noircies (pas plus de 5%), impureté organique (pas plus de 2%), impureté minérale (pas plus de 0,5%).

Selon les résultats d'une analyse phytochimique préliminaire, des huiles essentielles, des flavonoïdes, des tanins, des acides hydroxycinnamiques, des coumarines, des acides gras et des lactones sesquiterpéniques ont été trouvés dans l'herbe de Sivers et P.

Stocks de Sivers et P. d'un an. Le tableau 2 fournit des données sur les rendements, les réserves biologiques (BZ) et opérationnelles (EZ) de Sivers, ainsi que sur les récoltes annuelles dans différentes zones de Bouriatie.

Stocks de matières premières de Sivers et P. D'un an dans les régions de Bouriatie

zone de récolte (g / m2) E totale, surcroissance, (ha) BS (kg) EZ (kg)

env Ville de Gusinoozersk 58,0 ± 4,1 0,8 530,0 398,4

env c. Ganzurino 33,8 ± 2,4 0,4 ​​154,4 116,0

env c. Borates 220,6 ± 15,1 20,0 50160,0 41100,0

env avec Taphar 500,0 ± 26,3 0,5 2763,0 2237,0

env c. Sotnikovo 240,2 ± 19,4 25,0 69750,0 52850,0

env Ulan-Ude 500,0 ± 32,5 0,5 2815,0 2175,0

District de Kabansky 285.SH = 19,7 30,0 97320,0 73680,0

District de Tunkinsky 70,0 ± 8,0 0,2 172,0 108,0

District de Pribaïkalski 280,9 ± 25,3 1,0 3315,0 2297,0

District de Kurumkansky 370,6 ± 34,0 0,1 438,6 302,6

env c. Hurumsha 228,0 ± 10,8 0,6 1497,6 1238,4

env Population 500,0 ± 46,2 30,0 177720,0 122280,0

env c. Sotnikovo 39,0 ± 2,1 25,00 10800,0 8700,0

District de Kabansky 400,0 ± 27,1 30,0 136260,0 103740,0

La productivité de la partie aérienne de l'absinthe de Sivers et de la p annuelle dans les fourrés étudiés varie de 33,8 ± 2,4 à 500,0 ± 32,5 g / m2 et de 39 ± 2,1 à 500 ± 46,2 g / m2, respectivement. Les réserves biologiques et opérationnelles des parties aériennes des plantes étudiées sont de 154,4-97320,0 kg et 116,0-73680,0 kg (absinthe de Sivers), 1 497,6177720,0 kg et de 1238,4-122280,0 kg (absinthe annuelle).

Etude chimique de l'herbe de P. Sivers et P. des flavonoïdes annuels. La teneur quantitative totale en flavonoïdes a été déterminée par la méthode généralement admise de détermination spectrophotométrique dans les graminées de Sivers et de P. annual, en termes de lutéoline-7-glucoside à différentes phases du développement de la plante (végétation, bourgeonnement, floraison, fructification). La teneur la plus élevée en flavonoïdes a été établie dans les échantillons de Severs et d'échantillons d'un an recueillis dans la phase de bourgeonnement - 0,68 et 0,66%, la plus faible - dans les matières premières collectées dans la phase de fructification - 0,31% et 0,38% (tableau 3).

Le contenu quantitatif de la quantité de flavonoïdes en lutéoline-7-glucoside dans l'herbe de P. Sivers et dans l'herbe de P. un an en fonction de la phase de végétation

phase de développement des plantes, la quantité de flavonoïdes, en termes de lutéoline-7-glucoside (%)

Wormwood Sivers absinthe annuel

végétation 0,67 ± 0,02 0,64 ± 0,04

bourgeonnement 0,68 ± 0,05 0,66 ± 0,03

floraison 0,48 ± 0,03 0,52 ± 0,02

fructification 0,31 ± 0,01 0,35 ± 0,01

Les flavonoïdes suivants ont été détectés par la méthode HPLC-MS: rutine, lutéoline-7-glucoside, chryo-ériol, quercétine dans l'herbe de Sivers et dans l'herbe d'un an (Fig. 1).

Fig.1. Chromatogramme de flavonoïdes et de P. Sivers, P. un an.

La méthode standard externe a été utilisée pour déterminer la teneur quantitative en rutine, chrysérol et quercétine dans l'herbe de Sivers et dans l'herbe d'un enfant âgé d'un an (tableau 4).

La plus grande quantité de lutéoline-7-glucoside 0,04-0,08% (Sivers) et 0,88-1,77% (n. Un an) est contenue, la quercétine 0,001% (Sivers) et 0,0070,009% (n un an).

Le contenu quantitatif en flavonoïdes (HPLC-MS)

Collection de flavonoïdes de Sorm Wormwood (%)

rutine quercétine lutéoline-7-glucoside

Le district d'Ivolginsky, okr. c. Taphar, 0,002 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,040 ± 0,003

Le district d'Ivolginsky, okr. Sotnikovo 0.002 ± 0.0002 0.001 ± 0.0001 0.080 ± 0.005

La mouche a un an et le district d’Ivolginsky, okr. Sotnikovo 0,018 ± 0,001 0,007 ± 0,0003 0,880 ± 0,004

District de Kabansky, okr. c. Cafard 0.012 ± 0.002 0.009 ± 0.0003 1.700 ± 0.005

Acides gras. Les échantillons d'absinthe contiennent de 8 à 13 acides gras. Les acides commun aux deux espèces sont les acides palmitique (16: 0), linoléique (18: 2p6) et linolénique (18: ZpZ), en quantité de 56,87 à 82,67% (du total des acides gras) chez Severs, 58,36 à 67,19% N. un an (total des acides gras). En plus de ces acides, une quantité significative contient de l'acide 10-octadekénique (18: 1p8) compris entre 3,64% et 11,65%. Également dans tous les échantillons, des acides 10-méthyl-undécanoïque (° 12: 0) et 12-méthyl-tétradécanoïque (et 15: 0) ont été détectés, leur teneur ne dépassant pas 1%. Les chromatogrammes sont illustrés à la figure 2.

Fig. 2. Chromatogrammes d'acides gras (a) p. Sivers et (b) p. - un an (I - (16: 0), 2 - (18: 2п6), 3 - (18: ЗПЗ), 4 - (18: 1'8) ).

Composition élémentaire. Dans l'herbe de P. Sivers, qui pousse dans diverses régions de Bouriatie, la teneur en calcium est de 0,56 ± 0,02-0,89 ± 0,03%, le magnésium de 0,12 ± 0,01-0,28 ± 0,01%. La teneur la plus élevée en calcium et en magnésium est notée dans les échantillons collectés dans le district de Kurumkansky, la plus faible teneur en magnésium dans les matières premières du district de Tunkinsky et en calcium dans les plantes collectées dans le district de Selenginsky. Le fer est surtout présent dans les plantes de la région de Kurumkansky

(141,25 ± 12,13 mg / kg), moins - dans le district de Selenginski (141,25 ± 12,13 mg / kg).

La teneur en zinc varie de 23,73 ± 1,56 à 59,8 ± 1,56 mg / kg -. Sivers et âgés de un an à un âge de 55,32 ± 0,83 à 66,50 + 0,89 mg / kg, ce qui est acceptable pour le fonctionnement normal de processus biochimiques. La teneur en cuivre est de 8,42 ± 0,45-24,30 ± 1,56 mg / kg -n. Sivers, 9,37 + 0,18-13,48 + 0,44 mg / kg - âgé d'un an (la quantité requise est de 5 à 30 mg / kg). Le nickel dans l'herbe de Seabera contient 0,40 ± 0,01 -2,06 ± 0,03 mg / kg, ce qui correspond à un taux de besoin en plantes de 0,1 à 5 mg / kg. La teneur en cobalt de la plante ne doit pas dépasser 1 mg / kg, le plomb - 10 mg / kg, le cadmium - 0,2 mg / kg, le chrome - 1,0 mg / kg (Kabata-Pendias, 1989; Kashin, 2009). La teneur en cobalt est inférieure à 0,3 mg / kg et la teneur en plomb, à 3,19 ± 0,11 mg / kg, par an, 0,59 ± 0,02 mg / kg, cadmium - 0,18 ± 0,02 mg / kg, chrome - 0,76 ± 0,02 mg / kg. dans tous les échantillons. Ainsi, la teneur en macro et en micronutriments se situe dans des concentrations normales et suffisantes pour permettre aux fonctions vitales de s'épanouir.

Huile essentielle d'herbe d'absinthe Sivers. L'huile essentielle de plantes a été isolée par la méthode de la pharmacopée n ° 2. Dans divers échantillons de p.Sivers, la teneur en huile essentielle varie de 0,1 à 1,9%. Dans les huiles essentielles de Sivers, qui poussent dans différentes parties de la Bouriatie, plus de 80 composés ont été identifiés.

Nous avons étudié la composition des huiles essentielles isolées de l'herbe de l'absinthe Sivers, qui pousse dans différentes parties de la Bouriatie.

(Ivolginsky (1), Selenginsky (2), Kurumkansky (3), Pribaïkalski (4.9),

Tunkinsky (5), districts de Zakamensky (8), région d'Irkoutsk (île d'Olkhone) (6) et Mongolie (7). Le rendement le plus élevé en huile essentielle est celui de l’absinthe de Sivers dans les régions de Tunkinsky et Kurumkansky (0,4%). La quantité minimale d'huile a été isolée à partir de plantes récoltées sur le territoire de Zakamensky, dans les régions de Pribaïkalski et en Mongolie (0,1%) (Fig. 3).

La dynamique de l'accumulation d'huile essentielle a été étudiée en fonction de la phase de développement de la plante (Fig. 4). Les résultats ont montré que la plus grande quantité d’huile s’accumule en phase de floraison (0,6%),

Fig. 3. Le rendement en huile essentielle P. Sivers du lieu de croissance.

les phases de bourgeonnement et de fructification accumulent la même quantité d’huile essentielle (environ 0,3%).

1- 1,8-daneol I-terpinéal-4 3-p-pharmacne '1 ■ sishna-4,11-dnen

Fig. 5. Chromatogramme de l'huile essentielle P. Sivers.

Fig. 4. Le rendement en huile essentielle p.

Sivers à différentes phases du développement de la plante (saison de croissance, b - bourgeonnement, c - floraison,

Tous les composants de l'huile essentielle peuvent être divisés en deux groupes: constants, c'est-à-dire présents dans l'huile à toutes les phases du développement de la plante et apparaissant sporadiquement (mineurs). Dans tous les échantillons d'huile essentielle de Sivers, quelle que soit la zone de croissance de la plante, 1,8 cinéole (2,34–22,57%), terpinéol-4 (0,964,70%), germacrène E (8,66-12,36%), P-farnezen (0,64-5,17%), Selina-4,11-diène (0,97-4,66%), Néril-2-méthylbutanoate (4,80-8,79%) et Chamazulène (0,60-25,36%) (figure 5).

Les huiles essentielles, isolées à partir de plantes poussant dans les steppes, dans le district de Pribaïkalski (25,36%), contiennent la plus petite quantité de hamazulène et la plus petite, dans le district de Zakamensky (0,60%).

Dans la composition de l'huile essentielle isolée de plantes à différentes phases de développement - végétation, bourgeonnement, floraison et fructification, 54 composés ont été identifiés. Les composants constants sont le 1,8-cynéol, le linalol, le terpinéol-4, l'a-terpinéol, le p-farnezen, le sélina-4,11-diène, le chamazulène.

La teneur en chamazulène varie de 0,20 à 24,69% en phase de végétation, de 21,34 à 61,91% en phase de bourgeonnement, de 1,53 à 34,42% en phase de floraison, de 10,87 à 20,64% en phase de fructification. L'ensemble des composants apparaissant sporadiquement est significatif (jusqu'à 40 composés) tout en ayant un contenu quantitatif faible, il est donc difficile d'identifier la dépendance de leur composition à la phase de développement de la plante.

Pour évaluer l'influence de la phase de développement sur les composants de l'huile, on a utilisé le CIM (Fig. 6).

Fig. 6. Modèle de composition GK

huile essentielle de la phase de développement de Sivers (I-végétation, 2 bourgeons, 3 fleurs, 4 fruits)

c'est l'une des analyses

données multidimensionnelles, permettant d'allouer des variables cachées dans de grands tableaux de données et d'analyser des relations,

existant dans le système étudié. L'objectif de la méthode du composant principal est de remplacer la description originale des échantillons en utilisant p variables pour un nouveau formulaire, représenté dans l'espace des composants principaux (Esbenson, 2010).

Sur le modèle GK, il est possible de distinguer des zones séparées délimitées et correspondant à différentes phases de développement de l'absinthe Sivers, ce qui indique que la composition du beurre à différentes phases de développement diffère par la teneur en composés mineurs.

Ainsi, à différentes phases du développement de Sivers, la composition qualitative de l'huile essentielle coïncide de manière constante et diffère de celle des composés mineurs.

Une étude sur les phases de développement des plantes a montré que la plus grande quantité de chamazulène dans l'huile essentielle de Seversa se concentre dans les phases de bourgeonnement et de floraison, tandis que l'accumulation d'huile dans la phase de floraison est supérieure à celle de la phase de bourgeonnement. Par conséquent, au cours de ces phases, nous avons étudié les particularités de l’accumulation d’huiles essentielles dans diverses parties de la plante (Fig. 7).

A propos de la phase de bourgeonnement En phase de floraison

Fig. 7. Le rendement en huile essentielle dans diverses parties du Sivers.

L'huile essentielle extractible de différentes parties des plantes en phase de floraison a montré que les inflorescences (paniers) sont caractérisées par le rendement le plus élevé, que les feuilles sont plus petites et que les tiges sont minimes. En phase

Le bourgeonnement dans l'herbe de P. Sivers contient surtout de l'huile dans les bourgeons, un peu moins dans les feuilles et une quantité minimale d'huile dans les tiges.

Une analyse de l'huile essentielle de différentes parties de la plante a révélé que la composition la plus diversifiée de l'huile extraite des inflorescences et des bourgeons de graminées est de plus de 70 composants, alors plus de 40 composants des feuilles et moins de tous les composants de l'huile extraite des tiges sont d'environ 20 composants. Les composants constants des échantillons d'huiles essentielles, quel que soit leur emplacement, sont le 1,8-cynéol, le linalol, le terpinéol-4, le germacren 13, l'a-terpinéol, le a-bisabolol et le chamazulène (tableau 5).

Composants constants de l'huile essentielle d'absinthe Sivers

teneur en composants de composants en% d'huile totale

phase de floraison phase de bourgeonnement

inflorescences feuilles tiges bourgeons feuilles tiges

1,8-cinéole 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

linalol 5,93 1,38 0,65 + + 3,83

terpinéol-4 2,56 2,10 0,57 0,88 + 5,37

a-terpinéol 2,39 2,10 0,82 1,44 + 4,66

Germakren E 7,20 7,81 1,96 11,18 7,81 10,57

a-bisabolol 2,28 1,25 1,66 5,24 10,93 5,86

Chamazulene 6,23 23,02 37,11 7,81 21,17 3,51

L'analyse a montré que, dans différents domaines de croissance, à différents stades de développement et dans différentes parties de Seversa, la composition qualitative de l'huile essentielle coïncide de manière constante et diffère selon les composés à apparition sporadique.

Huile essentielle d'herbe annuelle d'absinthe. Comme dans le premier cas, la sélection de l'huile essentielle a été effectuée selon la méthode de la pharmacopée n ° 2. La composition chimique des huiles essentielles annuelles est représentée par 40 composants. Les composants constants sont l’artémisia cétone (10,24–14,62%), le caryophyllen (9,93–10,71%), le germacrene B (3,53–7,82%), le p-sélénène (21,75–29,46%), le karyofillène oxyde (4,44–14,31%) (Fig. 8).

À différents stades du développement de la plante, 0,5 à 0,7% d'huile essentielle est extraite de l'herbe de l'absinthe. Le rendement le plus élevé en huile essentielle en phase de floraison (0,7%) (Fig.9).

À tous les stades du développement des plantes, l'huile essentielle contient de l'artémisia cétone, karyofillen (3-sélénium, oxyde de caryophylne), dont la teneur en composants quantitatifs se modifie à différentes étapes du développement de la plante. et oxyde de caryofillène - en phase de floraison.

3. Chromatogramme d'huile essentielle P. Un an.

Fig. 9. Le rendement en huile essentielle par an dans les différentes phases du développement de la plante (végétation, bourgeon b, floraison c, fructification p).

Les glandes d'huiles essentielles sont inégalement réparties dans la plante. Par conséquent, les huiles essentielles peuvent être distinguées à partir de différentes parties de la plante, différant à la fois quantitativement et qualitativement.

Les particularités de l'accumulation d'huiles essentielles en phase de floraison dans diverses parties de l'absinthe annuelle (Fig. 10) ont été déterminées.

Plus de 60 composés ont été trouvés dans des huiles essentielles de différentes parties de la plante. Constant

les composants des huiles d’inflorescence, de feuilles et de tiges sont l’artemisia, l’alcool, le p-caryophillène,

L’artémisia cétone est la principale composante de l’huile essentielle annuelle. Elle ne se trouve pas dans l’huile des tiges, bien qu’elle en représente la moitié dans les inflorescences (49,14%) et près du tiers des feuilles (29,76%).

L'analyse des huiles essentielles a montré que, dans différentes zones de croissance, à différents stades de développement et dans différentes parties de l'herbe annuelle, ainsi que de l'herbe Sievers, la composition qualitative de l'huile essentielle est la même, constante et différente dans les composants qui apparaissent sporadiquement.

Développement d'une méthode de dosage de l'artémisinine dans l'absinthe par une méthode annuelle HPLC-MS

Sélection des conditions pour l'extraction quantitative d'artémisinine de l'absinthe annuelle. Développer une méthodologie quantitative

1 2 de la Fig. 10. Le rendement en huile essentielle dans différentes parties de l’année (1-inflorescence, 2-feuilles, 3-tiges).

Les déterminations de l'artémisinine dans l'herbe de P. des conditions d'extraction d'un an ont été choisies dans lesquelles l'extraction de l'artémisinine atteint sa valeur maximale. Les extraits obtenus par les méthodes de macération, d'extraction par ultrasons et d'extraction sous-critique de CO2 ont été analysés. Divers solvants ont été utilisés comme agents d'extraction (tableau 6). La teneur en artémisinine d'extraits séparés par extraction par ultrasons et macération à l'aide de solvants différents n'est pas significativement différente (0,038 à 0,040%). La plus grande quantité d'artémisinine (0,054%) est contenue dans l'extrait obtenu lors de l'extraction sous-critique de CO2.

Méthodes et paramètres d'extraction d'extraits de l'herbe d'absinthe d'un an selon diverses méthodes d'extraction ______

méthode d'extraction paramètres d'extraction / temps d'extraction teneur en artémisinine en%, en termes de a.s.s.

éthanol 24 h / rapport matières premières: solvant (1: 5), T = 25 ° С 0,040 ± 0,002

Macération éthanol 48 h / rapport des matières premières: solvant (1: 5), T = 25 ° С 0,038 ± 0,002

Hexane 24 h / échantillon: rapport de solvant (1: 5), T = 25 ° C 0,039 ± 0,002

acétate d'éthyle 15 min / rapport matières premières: solvant (1: 5), fréquence de sondage 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

éthanol 5 min / rapport matières premières: solvant (1: 5), fréquence sonore 50 KHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Extraction d'éthanol par ultrasons 10 min / Rapport matières premières: solvant (1: 5), fréquence sonore 50 KHz, T = 25 ° С 0,024 ± 0,001

éthanol 15 min / rapport matières premières: solvant (1: 5), fréquence sonore 50 KHz, T = 25 ° C, C 0,039 ± 0,002

éthanol 20 min / rapport matières premières: solvant (1: 5), fréquence sonore 50 kHz, T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

Extraction de CO2 par le CO2 24 h.1 débit 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0 à 6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Parmi toutes les méthodes d'extraction proposées, l'extraction par ultrasons est optimale (extractant à l'éthanol), car cette méthode est rapide (temps d'extraction de 15 minutes) et disponible au moyen d'instruments.

Méthode de détermination quantitative de l'artémisinine.

Le développement d'une technique de dosage de l'artémisinine dans l'herbe annuelle a été réalisé par HPLC-MS. Nous avons utilisé Agilent 1200 HPLC avec un détecteur MC ("ion trap") 6330, une méthode d’ionisation - électrospray. L’élution a été réalisée en mode isocratique (50% (A): 50% (B)), composition du tampon de départ (A) - solution aqueuse d’acide formique (pH = 3) + 2 ml d’une solution saturée d’acétate d’ammonium, tampon d’élution (B) - 100% l'acétonitrile. Le débit volumétrique d'éluant est de 0,5 ml / min, le volume de l'échantillon injecté est de -25 µl. Les ions ont été enregistrés dans le mode de surveillance des ions chargés positivement (MRS) avec une masse de 300 (en raison de l'ajout de l'ion NrH4 à la molécule d'artémisinine), largeur de la fenêtre (299301) m / z. Les résultats ont été confirmés par spectrométrie de masse en tandem: un ion fille (MS2) d’une masse de 223 m / z a été obtenu à partir de l’ion parent (MS) d’une masse de 300 m / z.

La coïncidence des temps de rétention et des spectres de masse de l'artémisinine, déterminée dans l'herbe d'un an à l'aide de la solution de CO du composé indiqué, permet de conclure que le composé pur est identique à l'artémisinine pure (Fig.11, 12).

Fig. 11. Chromatogramme d'extrait de CO artémisinine et P. annual.

iv ix язтжяауат ассс »

Fig.12. Spectres de masse de l'artémisinine a) contenus dans l'herbe annuelle, b) de l'artémisinine CO.

Pour la spectrométrie de masse chromatographie, une méthode d'étalonnage absolu a été utilisée pour l'analyse quantitative. Pour déterminer le coefficient de la courbe d'étalonnage, plusieurs (au moins 20) solutions d'étalonnage d'artémisisinine ont été préparées. La préparation des solutions a été effectuée comme suit: 5 * 10 "3 g d'artémisinine ont été pesés, placés dans une fiole jaugée de 50 ml, 25 ml d'acétonitrile ont été ajoutés. Le contenu de la fiole

soigneusement mélangé jusqu'à dissolution complète, après quoi le volume dans le ballon a été amené au trait avec de l'eau distillée. Analyse conduite à différents volumes de l'échantillon injecté de 1 à 40 µl. La surface de pic dans les chromatogrammes a été mesurée. Selon les données obtenues, une courbe d'étalonnage a été construite (Fig. 13). Les valeurs de la surface du pic ont été tracées sur l'axe des ordonnées et les valeurs correspondantes de la teneur en artémisinine (g) ont été portées sur l'axe des abscisses.

À partir des données obtenues, le coefficient de la courbe d'étalonnage a été calculé: к = Б / х, où к est le coefficient de la courbe d'étalonnage, 5 est la surface du pic de la solution analysée, х est le contenu en artémisinine (g).

Le coefficient de la courbe d'étalonnage (k) est défini comme la moyenne arithmétique des coefficients k,.

Fig. 13. Tableau de graduation pour la détermination de la teneur en artémisinine.

La teneur en artémisinine de l'extrait d'absinthe d'un an a été déterminée à l'aide de la formule suivante: C = 5 / c, où 5 représente l'aire de pic d'artémisinine dans la solution analysée et k le coefficient de la courbe d'étalonnage. Les données métrologiques sur la détermination du coefficient de la courbe d'étalonnage (k) sont présentées au tableau 7.

Caractéristiques métrologiques du calcul du coefficient de la courbe d'étalonnage artémisinine

1 X Э2 Э Р ЮУ) Дх Е,%

19 1,32 * 10m 1,84 * Ô15 4,25 * 10 "95 2,09 1,28 * 10" 1,97 1,90 * 10 "

Les résultats de la détermination quantitative de l'artémisinine dans l'extrait annuel d'absinthe sont présentés dans le tableau 8.

Résultats de la détermination quantitative de l'artémisinine dans la méthode de l'extrait d'absinthe d'un an HPLC-MS

Caractéristiques métrologiques (n = 5, P = 95%)

0,039 0,75 * 10 "'0,27 * 10" 2 2,57 0,83 * 10 ° 1,21 0,12 * 10 "'

La méthode développée a déterminé la teneur quantitative en artémisinine dans l'herbe N. Un an en phase de floraison (tableau 9). La technique est validée - spécificité, précision confirmée.

Le contenu d'artémisinine dans l'absinthe annuelle d'herbe

Zone d'artémisinine et date de collecte (%)

Ivolginsky district, à 10 km de Sotnikovo, 08/12/2010 0.054 ± 0.003

Ivolginhiy rn, à 10 km de Sotnikovo, le 22/08/2011 0.027 ^.001

Le district d'Ivolginsky, okr. c. Oriole, 19/08/2011 0,069 ± 0,004

District de Kabansky, okr. c. Tarakanovka, le 08.22.2011 0.023 ± 0.001

Dans des échantillons prélevés dans la région d’Ivolginsky, à proximité de L 'Oriole contient la plus grande quantité d' artémisinine (0,069%), la plus petite parmi les échantillons prélevés dans le district de Kabansky, en okr. c. Blatte (0,023%). Il a été établi que la plus grande quantité d’artémisinine se concentre en phase de floraison - 0,039%, la plus petite - en végétation et en bourgeonnement - de 0,006 à 0,007%. Les inflorescences d'artémisinine contiennent - 0,029%, légèrement moins - 0,021% dans les feuilles et la quantité minimale dans les tiges est de 0,007% (tableau 10).

Le contenu d'artémisinine dans l'herbe de l'absinthe annuelle, en fonction de la phase de végétation, dans différentes parties de la plante

phase de développement de l'usine

végétation bourgeonnement floraison feuilles inflorescence tiges

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

Ainsi, le moment optimal pour la collecte de l'herbe de l'absinthe annuelle est la phase de floraison et il est conseillé de collecter la totalité de la partie aérienne.

Tous les résultats obtenus sont inclus dans les projets FS sur l'herbe de l'absinthe Sivers et l'herbe de l'absinthe annuelle.

1. Les principales caractéristiques diagnostiques de l'herbe de Sivers et de P. un an ont été révélées, les indicateurs numériques nécessaires à la normalisation des matières premières ont été mis au point. Les réserves de Sivers et de P., qui poussent dans différentes régions de la République de Bouriatie, sont identifiées.

2. La teneur en flavonoïdes, en acides gras, en macro et en micronutriments dans l'herbe de Sivers n et dans l'herbe de N. Un an a été établie. Les flavonoïdes - lutéoline-7-glucoside, rutine, quercétine et chryoériol ont été détectés par la méthode HPLC-MS sur ces plantes. Les principaux acides gras des types d’absinthe étudiés sont l’acide palmitique, linoléique, linolénique et à 10% d’octadekéniques.

3. Il a été établi que la composition qualitative des huiles essentielles de plantes reste constante quels que soient le lieu de croissance et la phase de développement. Les composants constants de Sivers sont le 1,8-cynéol, le terpinéol-4, le D-germacren, le p-farnésen, le Selina-4,11-diène, le néyl-2-méthylbutanoate et le chamazulène, et l'Artemisia cétone, le caryofillène, le germyrène, âgés d'un an. D, p-sélénène, oxyde caryophile. L'accumulation d'huile essentielle dans la phase de floraison est supérieure (0,7%) à celle dans la phase de bourgeonnement (0,3%). La plus grande quantité de chamazulene p. Sivers s'accumule au cours des phases de bourgeonnement (jusqu'à 62%) et de floraison (jusqu'à 34%).

4. Les conditions d'extraction de l'artémisinine (type d'extractant, méthode d'extraction, durée d'extraction) de la plante annuelle ont été déterminées et il a été établi que l'extraction maximale de l'artémisinine est obtenue par extraction ultrasonore et précorrigée au CO2. Une méthode de détermination quantitative de l'artémisinine a été développée et validée selon une méthode HPLC-MS d'un an (erreur relative de détermination de ± 1,21%). Il a été établi que la plus grande quantité d'artémisinine dans l'herbe d'une plante annuelle s'accumule pendant la phase de floraison dans les inflorescences (0,039%).

5. Élaboration de documents de réglementation pour les matières premières - le projet de FS «L'armoise de l'absinthe» et le projet de FS de «L'herbe d'absinthe un an».

Liste des articles publiés sur le sujet de la thèse

1. Zhigzhitzhapova, C.B. La composition chimique de l'huile essentielle Artemisia gmelinii Web. et Stechm, originaire d’Asie centrale / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva et Plant Chemistry.-2010.-№2.-С. 131-133.

2. Zhigzhitzhapova, C.B. Composition chimique de l'huile essentielle d'absinthe Sivers Artemisia sieversiana Willd., Cultivée en Bouriatie / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bulletin de l'Université d'Etat de Buryat. Ser. Chimie-Physique. - 2009. -Avec. 3. - pages 69-71.

3. Zhigzhitzhapova, C.B. Composition de l'huile essentielle d'absinthe de Sivers Artemisia sieversiana Willd., Cultivée en Bouriatie et dans la région d'Irkoutsk / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bulletin du Centre scientifique de Sibérie orientale de la branche sibérienne de l'Académie des sciences médicales de Russie. - 2009. - №2 (66). -C. 103-105.

4. Zhigzhitzhapova, S.V. La composition de l'huile essentielle Artemisia sieversiana Willd. à différentes phases du développement des plantes / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // Bulletin du Centre scientifique sibérien oriental de la branche sibérienne de l'Académie des sciences médicales de Russie. - 2011. - №1 (77). Partie 2. - Pages 138-141.

5. Soktoeva, TE La composition de l'huile essentielle d'Artemisia glauca Pall, ex Willd. flore de la Mongolie / T.E. Soktoeva, S.V. Zhigzhitzhapova, LD

Radnaeva, B.B. Taraskin // Bulletin de jeunes scientifiques. - Tomsk, 2011. -Vyp. 2. - pages 27-30.

6. Soktoeva, TE La composition chimique de l'huile essentielle Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Soktoev // Lomonosov-2009: matériel du XVI Intern. conf. étudiants, étudiants diplômés et jeunes scientifiques. - Moscou, 2009. - page 37.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Huile essentielle d'absinthe Flore de Gmelin Bouriatie et Mongolie / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // “Nouvelles réalisations dans la chimie et la technologie chimique des matières premières végétales”: matériaux de IV Russie. scientifique conf. - Barnaul, 2009. - Pages 49 à 50.

8. Soktoeva, T.E. La composition de l'huile essentielle d'absinthe de Sivers Artemisia sieversiana Willd., Qui pousse en République de Bouriatie / T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // “Technologies et équipements des industries chimiques, biotechnologiques et alimentaires”: matériaux du II Vseross. scientifique conférence étudiants, étudiants diplômés et jeunes scientifiques. - Biysk, 2009. - Pages 91-93.

9. Pavlova E.T. Séparation chromatographique et détermination quantitative des composants de médicaments par HPLC / TE Soktoeva, T.A. Kolodin // «Problèmes de développement durable de la région»: matériel du cinquième séminaire-école destiné aux jeunes scientifiques russes. - Ulan-Ude, 2009. - Pages 222-223.

10. Zhigzhitzhapova, S.V. Analyse comparative des compositions chimiques d'Artemisia L., croissant en Asie centrale / S.V. Zhigzhitzhapova, T.E. Soktoeva, L.D. Radnaeva, O. Grahl-Nilsen // “Méthodes modernes d'analyse de données” Septième symposium d'hiver sur la chimiométrie. - Saint-Pétersbourg, 2010. - Pages 82-83.

11. Soktoeva, T.E. Analyse comparative de la composition des huiles essentielles de la polynie du genre Artemisia L., cultivées en Asie centrale / TE Soktoeva // "Technologies et matériaux respectueux de l'environnement et économes en ressources": matériaux de la région, jeunes scientifiques. conf. de stagiaire participation. - Ulan-Ude, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Huiles essentielles du genre Artemisia L. / C.B. polynia. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // “Le développement de la médecine traditionnelle en Russie: expérience, recherche, perspectives”: materials nauchn. conf. de stagiaire participation. - Ulan-Ude, 2010. - Pages 405-407.

13. Soktoeva, T.E. La composition de l'huile essentielle d'absinthe Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // “Études actuelles sur l’Asie baïkalienne”: matériel du stagiaire. scientifique Conf, - Ulan-Ude, 2010. - p 309-312.

14. Badmaeva, E.E. La composition de l'huile essentielle Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess, grandissant en Mongolie / E.E. Badmaeva,

T.E. Soktoeva // «Écologie de la Russie et des territoires adjacents»: matériaux de la XVème Internationale. environnement con. - Novosibirsk, 2010. - page 325.

15. Badmaeva, E.E. La composition de l'huile essentielle Artemisia annua / EE. Badmaeva, T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Technologies respectueuses de l'environnement et respectueuses de l'environnement": matériaux vs matériaux. conférence jeunesse de stagiaire participation. - Ulan-Ude, 2011. -C. 156-157.

16. Soktoeva, T.E. Extraction de l'artémisinine à partir d'absinthe annuelle Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // “Priorités et caractéristiques du développement de la région de Baïkal”: matériaux du Vème international. scientifique conf. - Ulan-Ude, 2011. - p 127-128.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. La composition chimique de Artemisia annua L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // «Végétation de la région de Baïkal et des territoires adjacents»: matériaux de Vseross. scientifique conf. - Ulan-Ude, 2011. - Pages 152-153.

Spectrophotométrie d'absorption atomique AAS

A.S. matières premières absolument sèches

Substances biologiquement actives

GZ réserves biologiques

Chromatographie sur papier BH

Organisation mondiale de la santé de l'OMS

Chromatographie en phase liquide à haute performance HPLC-MS

Pharmacopée d'État GF

Méthode ISC des composants principaux

Échantillon standard de CO

ces chromatographie en couche mince

EZ réserves opérationnelles

Surveillance des réactions SRM Select

L’auteur exprime sa sincère gratitude au directeur des études, D.Sc., prof. LD Radnaeva, ainsi que Ph.D., professeur agrégé, chercheur principal Institut de Baïkal pour la gestion de la nature en Sibérie de l'Académie des sciences de Russie Zhigzhitzhapova C.B., docteur en chimie, professeur honoraire Université d’État de Tomsk Ryzhova G.L. pour l'aide et le soutien dans la préparation de la thèse.

Elle était signée à l'impression le 21/11/2011. Format 60x84 1/16. Papier offset. Volume 1,5pech. l Circulation 100. Numéro d'ordre 67.

Imprimé dans la maison d'édition de la maison d'édition BNTS SB RAS. 670047 Ulan-Ude, ul. Sakhyanova, 6.

Table des matières de la thèse de Soktoev, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Chapitre 1. REVUE DE LA LITTÉRATURE

L’état actuel des recherches sur l’étude du genre Artemisia L.

1.1. Caractéristiques botaniques de l'absinthe Sivers et de la 12e absinthe annuelle

1.2. Huiles essentielles et plantes d'azulène naturelles du genre Wormwood

1.2.1. La composition chimique des huiles essentielles et de l'azulène naturel 14 plantes du genre Wormwood

1.2.2. L'utilisation des huiles essentielles de plantes du genre Wormwood en médecine

1.2. Artémisinine: découverte, structure et synthèse, propriétés physico-chimiques 31, mécanisme d'action antiplasmodique

1.3. Composition en acides gras des plantes du genre Wormwood

1.4. Composés phénoliques de plantes du genre Wormwood

1.5 La composition élémentaire des plantes du genre Wormwood 38 CONCLUSIONS DU CHAPITRE

CHAPITRE 2. CARACTÉRISTIQUES DES OBJETS ET MÉTHODES 41 RECHERCHE

2.1. Objets d'étude, échantillons de matières premières - herbe de l'absinthe Sivers et 41 herbes d'absinthe annuelles

2.2. Méthodes de recherche

2.2.1. Méthodes de recherche biologique

2.2.1.1. Etude anatomique et diagnostique

2.2.1.2. Recherche de ressources

2.2.2. Méthodes de détermination qualitative et quantitative de 43 substances biologiquement actives

2.2.3. Analyse de marchandisage: méthodes d'établissement de 50 matières premières de bonne qualité

2.2.4. Méthodes de traitement statistique. La méthode du composant principal.

CHAPITRE 3. ANALYSE PHARMACOGNOSTIQUE DE HERBAL HERBALIS 53 CIVERS

3.1. Analyse microscopique de l'herbe de l'absinthe

3.2. Sibers stock d'absinthe

3.3. L'étude de l'absinthe sur l'herbe BAS

3.3.1. Contenu qualitatif et quantitatif des composants 64 huile essentielle d’absinthe de Sivers

3.3.1.1. Composition chimique et dynamique de l'accumulation d'huile essentielle et de 64 hamazulena dans l'herbe de l'absinthe du Sivers dans diverses régions de Bouriatie

3.3.1.2. Particularités de l'accumulation d'huile essentielle et de chamazulène dans l'herbe de l'absinthe à 65 degrés à différentes phases du développement de la plante

3.3.1.3. L'accumulation de composants mineurs de l'huile essentielle de l'herbe 71 absinthe

3.3.1.4. Caractéristiques de l'accumulation d'huile essentielle et de chamazulène dans l'herbe Absinthe 72 Sivers provenant de différentes parties de la plante

3.3.2. Le contenu qualitatif et quantitatif des flavonoïdes et des tanins dans l'herbe de l'absinthe

3.3.3. Composition en acides gras de l'herbe de l'absinthe

3.3.4. Composition élémentaire de l'herbe absinthe annuelle CONCLUSIONS AU CHAPITRE

CHAPITRE 4. ANALYSE PHARMACOGNOSTIQUE DES HERBALES HERBALES 83 UN AN

4.1. Analyse microscopique de l'absinthe annuelle

4.2. Stocks d'absinthe annuelle

4.3. L’étude de l’année principale de l’absinthe d’herbe BAS

4.3.1. Le contenu qualitatif et quantitatif des composants de l'huile essentielle dans l'herbe d'absinthe annuel

4.3.1.1. Composition chimique et dynamique de l'accumulation d'huile essentielle dans 92 herbes d'absinthe d'un an provenant de différents lieux de croissance

4.3.1.2. Particularités de l'accumulation d'huile essentielle dans l'herbe de l'absinthe ^ annuelle sur différentes phases de développement et dans différentes parties de la plante

4.3.2. Détermination qualitative et quantitative des flavonoïdes sur l'herbe 100 absinthe par an

4.3.3. Composition en acides gras de l'absinthe annuelle ^ ® *

4.3.4. La composition élémentaire de l'herbe absinthe annuelle

4.4. Mise au point d'une méthode de dosage de l'artémisinine dans l'herbe d'une absinthe au moyen d'une méthode annuelle de HPLC-MS

4.4.1. Sélection des conditions d'extraction quantitative de l'artémisinine à partir de 103 résineux d'un an

4.4.2. Développement d'une technique de détermination quantitative de l'artémisinine 104 par HPLC-MS

4.4.3. Contenu quantitatif en artémisinine dans l'absinthe annuelle provenant de différents lieux de croissance

4.4.4. Analyse du contenu quantitatif en artémisinine dans l'herbe 107 absinthe annuelle sur différentes phases de développement et dans différentes parties de la plante

CHAPITRE 5. MISE EN PLACE DES INDICATEURS 111 BIEN-ÊTRE DES MATIÈRES PREMIÈRES

5.1. Indicateurs morphométriques de matières premières

5.2. Normalisation de l'absinthe

5.2.1. Indicateurs de marchandisage herbe Stellaire!

5.2.2. Normalisation de l'herbe d'absinthe Sivers en fonction de la teneur en huile essentielle de 115 hamazulelen

5.2.3. Établir la durée de conservation de l'herbe d'absinthe Sivers

5.3. Normalisation de l'herbe absinthe annuel ^^ ^

5.3.1. Indicateurs de produits herbe sagebrush annuel * '^

5.3.2. Normalisation annuelle de l'absinthe herbacée sur le contenu d'artémisinine

5.3.3. Établir la durée de conservation de l'absinthe annuelle aux herbes

Introduction de la thèse sur le thème "Chimie pharmaceutique, pharmacognosie", Soktoeva, Tuyana Erdemovna, résumé

Pertinence du sujet. Les plantes du genre Artemisia (absinthe) sont des sources prometteuses de substances biologiquement actives, telles que l'absinthe à l'estragon Artemisia dracunculus L., l'absinthe Artemisia absinthium L., l'absinthe Artemisia vulgaris L. est largement utilisée dans la médecine traditionnelle et l'industrie alimentaire. Artemisia annua L., une absinthe annuelle, a été introduite avec succès dans de nombreux pays. En 2001, elle a été recommandée par l'OMS comme source principale d'artémisinine, le traitement de première intention contre le paludisme. Aujourd'hui, les pays producteurs d'artémisinine fournissent environ un quart des besoins mondiaux en matière de santé [1, 2]. Parmi les sujets d'un an, 137 composés biologiquement actifs ont été isolés, dont 40 sesquiterpènes, 10 triterpènes, 7 coumarines, 46 flavonoïdes, qui peuvent servir de base au développement d'un médicament [3]. Dans les années 80 du 20ème siècle, un groupe de scientifiques [4] a tenté de cultiver la partie de la flore sauvage d'un an de l'URSS dans l'ULI (Moscou). L’Université d’État de Tomsk est actuellement en préparation de travaux majeurs sur l’introduction du programme de première année. En Bouriatie, Annuelle est une espèce à croissance sauvage.

Artemisia sieversiana Willd, une espèce d'absinthe, est répandue, tout comme la fillette âgée d'un an en Bouriatie, qui est également une espèce prometteuse. Dans l'herbe de P. Sievers contiennent des flavonoïdes, de l'huile essentielle, des coumarines [5-8]. L'huile essentielle de Seabera présente un intérêt en tant que source de chamazulène, un composé non toxique ayant des effets anti-inflammatoires, bactéricides et régénérants [9, 10].

Jusqu'à présent, une étude chimique détaillée de l'absinthe et de l'absinthe de la flore annuelle de la Bouriatie de Sivers n'a pas été réalisée en tant que source prometteuse de substances biologiquement actives. Leur étude est donc une tâche urgente.

Objectif: Etude pharmacognostique de l’Arsinthe de Sivers Artemisia sieversiana Willd. et Artemisia annua L., une plante annuelle d'absinthe, en tant que sources précieuses de substances biologiquement actives.

Pour atteindre cet objectif, il est nécessaire de résoudre les tâches suivantes:

1. Identifier les caractéristiques anatomiques et diagnostiques de la partie aérienne de Sivers (un an), établir des indicateurs de matières premières pour les matières premières, évaluer les réserves et les possibilités de récolte (un an et des sivers sur le territoire de la République de Bouriatie)

2. étudier la composition chimique des principaux groupes de substances biologiquement actives de ces plantes et déterminer leur contenu quantitatif, établir la localisation des huiles essentielles et de l'artémisinine dans des parties individuelles de plantes, étudier la dynamique de leur accumulation dans les phases de développement et déterminer les conditions optimales de collecte;

3. Développer une méthode pour la détermination quantitative de l'artémisinine dans la partie aérienne de l'enfant d'un an;

4. Déterminer les indicateurs de qualité et les normes pour le contenu des substances biologiquement actives de base, élaborer une documentation réglementaire sur les matières premières médicinales - l'herbe de l'absinthe Sivers et l'herbe de l'absinthe annuelle.

Nouveauté scientifique. Les principales caractéristiques diagnostiques de l'herbe de Sivers et de P. annual ont été établies, ainsi que les indicateurs numériques nécessaires à la normalisation des matières premières.

Une étude a été réalisée sur la composition chimique de l'herbe de Sivers et de l'herbe d'un an. La teneur en huiles essentielles, flavonoïdes, acides gras, macro et micro-éléments a été déterminée. Les flavonoïdes - lutéoline-7-glucoside, rutine, quercétine et chryoériol ont été détectés par la méthode HPLC-MS sur ces plantes. Les principaux acides gras des types d’absinthe étudiés sont l’acide palmitique, linoléique, linolénique et à 10% d’octadekéniques.

Les conditions d'extraction de l'artémisinine (type d'extractant, méthode d'extraction, durée d'extraction) de la plante annuelle ont été déterminées et il a été établi que l'extraction maximale de l'artémisinine est obtenue par extraction ultrasonore et subcritique au CO2. Par HPLC-MS, il a été établi que la plus grande quantité d'artémisinine chez l'enfant d'un an se trouvait dans la phase de floraison des inflorescences.

Étude de la dynamique de l'accumulation d'huile essentielle, en fonction de la phase de développement et d'une partie de la plante. La plus grande quantité d'huile essentielle de chamazulène P. Siversa s'accumule pendant les phases de bourgeonnement et de floraison des inflorescences.

Les indicateurs de qualité établis de BAS inclus dans les documents réglementaires.

Signification pratique. Les réserves et le volume annuel possible d’achat d’un règlement de Sivers et d’un règlement d’un an sur le territoire de la République de Bouriatie (règlement de Sivers - de 0,1 à 73,7 tonnes par an, et d’un règlement d’un an de 1,2 à 122,3 tonnes par an).

Une technique a été développée pour la détermination quantitative de l'artémisinine dans l'herbe par une méthode HPLC-MS annuelle. Les conditions pour la préparation des échantillons de matières premières à analyser pour la détermination quantitative de l'artémisinine sont scientifiquement justifiées.

La normalisation des matières premières a été effectuée et des projets de systèmes de stockage ont été développés - «Sivers Wormwood Herbal» et «Wormwood One Year Grass».

Le degré de mise en œuvre. La méthode d'extraction des huiles essentielles et les données d'analyse microscopiques ont été testées et introduites dans le processus pédagogique du département de pharmacie de l'établissement d'enseignement supérieur professionnel «Université de Bouriatie» (Loi de mise en œuvre n ° 1 du 6 septembre 2011). Des projets de FS sur l'herbe de l'absinthe Sivers et l'absinthe d'un an sont préparés pour examen.

Approbation du travail. Les principales dispositions de la thèse ont été présentées et discutées lors: d'une conférence scientifique et pratique à participation internationale intitulée «Le développement de la médecine traditionnelle en Russie: expérience, recherche, perspectives» (Ulan-Ude, 2010); 7e symposium d'hiver sur la chimiométrie "Méthodes modernes d'analyse des données" (Saint-Pétersbourg, 2010); la conférence scientifique internationale consacrée au 15e anniversaire de l'Université d'Etat de Bouriatie "Etudes actuelles sur l'Asie du Baïkal" (Oulan-Oude, 2010); 5e conférence scientifique et pratique internationale "Priorités et caractéristiques du développement de la région de Baïkal" (Ulan-Ude, 2011); Xème conférence scientifique et pratique internationale "Problèmes de botanique de la Sibérie du Sud et de la Mongolie" (Barnaul, 2011); IVe Conférence panrusse "Nouveaux progrès de la chimie et de la technologie chimique des matériaux de plante" (Barnaul, 2009); XVIe Conférence internationale d'étudiants, de diplômés et de jeunes scientifiques "Lomonosov-2009" (Moscou, 2009); XVe Conférence internationale des étudiants en écologie "Écologie de la Russie et des territoires adjacents" (Novossibirsk, 2010); II Conférence scientifique et pratique pan-russe regroupant des étudiants, des étudiants diplômés et de jeunes scientifiques "Technologies et équipements de l'industrie chimique, biotechnologique et alimentaire" (Biysk, 2009); Conférence scientifique et pratique pan-russe "La végétation de la région de Baïkal et des territoires adjacents" (Ulan-Ude, 2011); 5e séminaire scolaire de jeunes scientifiques de Russie sur «Les problèmes du développement durable de la région» (Ulan-Ude, 2009); la conférence scientifique et pratique régionale pour les jeunes avec une participation internationale "Technologies et matériaux respectueux de l'environnement et respectueux de l'environnement" (Ulan-Ude, 2010).

Les travaux ont été réalisés dans le cadre de projets de recherche: RFBR: n ° 08-04-90202-Monga «Étude des schémas biogénétiques de biosynthèse de composés biologiquement actifs de plantes endémiques de l'Asie centrale» (2008-2009), n ° 08-04-9803 7-rsibirya et

La composition chimique des plantes en tant qu'indicateur de l'état des écosystèmes de la région de Baïkal "(2008-2010); projet d'intégration interdisciplinaire №93 "Développement de la recherche dans le domaine de la chimie médicale et de la pharmacologie en tant que base scientifique pour la mise au point de médicaments nationaux"; un projet commun avec l'Académie des sciences de Mongolie "Obtenir de nouvelles formes de médicaments sous forme de liposomes et de nanosomes à l'aide de matières premières naturelles"; RFBR: № 10-03-16001-mobzros «Mobilité des jeunes scientifiques» (2010), № 11-03-90705-mobst travaux scientifiques (formation) de jeunes scientifiques russes dans les principales organisations scientifiques de la Fédération de Russie, 2011 (2011).

Publications. Selon les résultats, 17 articles scientifiques ont été publiés, dont 3 dans des périodiques recommandés par la Commission d'attestation supérieure du ministère de la Défense et des Sciences de la Fédération de Russie.

À la défense sont sortis:

• les résultats de l'étude de la structure anatomique, des stocks, des critères d'authenticité de Sivers et de P., en croissance en Bouriatie;

• résultats d'une étude chimique de substances biologiquement actives et de leur dynamique saisonnière d'accumulation;

• les résultats d'études sur la normalisation de la partie aérienne de Sivers, page par année.

Plus D'Articles Sur Les Orchidées